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細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成及如何儲(chǔ)存血清?

更新時(shí)間:2022-11-03  |  點(diǎn)擊率:744

胎牛血清是指懷孕5-8個(gè)月的母牛被屠宰后,發(fā)育未完quan的胎牛心臟穿刺采血后,通過一系列工藝處理最終獲得。此時(shí)胎牛血中含有特殊的生長(zhǎng)發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育完quan這些因子自動(dòng)消失。那么,面對(duì)如此珍貴的胎牛血清,實(shí)驗(yàn)人該如何防治黑點(diǎn)生成、如何儲(chǔ)存使用血清呢?

1、 細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成?

答:(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。

(2) 培養(yǎng)基無需37℃水浴。

(3) 培養(yǎng)基保持最佳PH值7.0- 7.2。

(4) 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),容器定期刷洗。

(5) 掌握細(xì)胞傳代的最佳時(shí)機(jī),細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過老。

2、如何儲(chǔ)存使用血清?

答:儲(chǔ)存條件:血清一般儲(chǔ)存于-20℃,同時(shí)應(yīng)避免反復(fù)凍融。購買大包裝的血清后,需要分裝成小包裝,儲(chǔ)存于-20℃,使用前融化。關(guān)于血清融化,我們推薦以三步來進(jìn)行(詳細(xì)可參閱《關(guān)于胎牛血清知識(shí)問答(一)》)。例如,500ml的胎牛血清,首先在室溫條件下放置90min,然后再20℃水浴放置25min,最后在37℃水浴放置35分鐘即可。

使用濃度:自從有了合成培養(yǎng)基,血清就是作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用,使用濃度一般為5-20%,常用是10%。過多血清容易使培養(yǎng)中的細(xì)胞發(fā)生變化,特別是一些二倍體的無限細(xì)胞系,迅速生長(zhǎng)之后容易發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。

Ausbian血清品牌,是來自于國(guó)際*級(jí)品質(zhì)的血清生產(chǎn)廠,又經(jīng)嚴(yán)格的檢測(cè)篩選,為中國(guó)科研項(xiàng)目提供細(xì)胞培養(yǎng)的支持工作。Ausbian胎牛血清精選內(nèi)毒素極低,產(chǎn)量大于1600瓶(500毫升)的血清批次,滿足干細(xì)胞、基因敲除、原代培養(yǎng)、細(xì)胞典藏、長(zhǎng)期傳代等各類細(xì)胞的培養(yǎng)要求;完整的檢測(cè)報(bào)告,及滅病毒服務(wù),為各類臨床相關(guān)項(xiàng)目的申報(bào)提供完整支持。

 

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