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葉酸測(cè)定培養(yǎng)基中的葉酸是采用什么方法測(cè)定的

更新時(shí)間:2022-03-24  |  點(diǎn)擊率:544
  葉酸測(cè)定培養(yǎng)基的使用需確保不含有葉酸,其他營(yíng)養(yǎng)齊全。若自行配制培養(yǎng)基,需確保原材料中不含有葉酸,制備過(guò)程不可污染葉酸。試驗(yàn)中使用的玻璃器具需洗凈后在200℃烘至少2h,必要時(shí)可預(yù)先用1mol/L的稀鹽酸浸泡再烘,充分去除容器中可能殘留的葉酸。水的潔凈程度對(duì)本試驗(yàn)至關(guān)重要,若水中有葉酸殘留或接觸了有葉酸殘留的容器,將直接影響到試驗(yàn)結(jié)果。
  葉酸測(cè)定培養(yǎng)基中的葉酸是采用什么方法測(cè)定的:
  液相柱后衍生法利用葉酸經(jīng)氧化劑氧化后具有熒光特性,采用柱后衍生法熒光檢測(cè)器測(cè)定,大大提高了檢測(cè)葉酸的靈敏度(較紫外檢測(cè)提高了2個(gè)數(shù)量級(jí)),避免了使用離子對(duì)試劑傷害柱子且能夠準(zhǔn)確定量,本方法簡(jiǎn)單、快捷、靈敏,滿(mǎn)足日常分析要求。
  同位素放射免疫法對(duì)多谷氨酸葉酸反應(yīng)的相對(duì)靈敏度有較大的差別,隨著葉酸濃度增加,反應(yīng)的相對(duì)靈敏度增加,但多谷氨酸葉酸的反應(yīng)曲線不可能與單谷氨酸葉酸的反應(yīng)曲線重合;另一方面,多谷氨酸葉酸與結(jié)合蛋白的親合性與單谷氨酸葉酸相比較高,不同的單谷氨酸葉酸衍生物反應(yīng)靈敏度不同,放射免疫法也不適用于檢測(cè)單谷氨酸葉酸衍生混合物。該方法具有快速、簡(jiǎn)便的特點(diǎn),同時(shí)由于葉酸放射免疫試劑盒的出現(xiàn),很快得到普及,尤其廣泛應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室。但放射免疫法可用于檢測(cè)和評(píng)價(jià)葉酸的營(yíng)養(yǎng)狀況,從定量檢測(cè)的角度來(lái)講,難以得到準(zhǔn)確的葉酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)值。
  微生物測(cè)定法的特點(diǎn)是靈敏度高,樣品中被測(cè)物量含量極低時(shí)也能被測(cè)出。樣品處理簡(jiǎn)單,不需要一系列的提純步驟,前處理操作步驟簡(jiǎn)單。微生物法是目前應(yīng)用為廣泛的,也是美國(guó)分析化學(xué)家協(xié)會(huì)的推薦方法,我國(guó)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于嬰幼兒食品和乳品中葉酸含量的測(cè)定,微生物法是測(cè)定葉酸的方法。
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